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目前免疫测定可能是临床实验室应用最普遍的技术了,而酶联免疫测定因其稳定性、方便性、成本低等多项优势一直在临床实验室中占据着重要的地位。免疫检测发展的前期基本上都只用于定性检测,很少用于定量检测,但随着医疗技术的发展,不少项目的免疫测定进入了定量领域。经常有些人会问到,酶免可以做定量检测吗?答案当然是肯定的。
肝炎标志物检测是国内ELISA技术用得最多的检验项目。在判断检测结果时,以显色在酶标比色计上的比色读数是否超过判断限(临界值)为依据,作出报告阳性或阴性的结论。这是定性的结果。
随着免疫技术的发展,越来越多的单克隆抗体的应用,各种表面的微孔板、纸片、CAP、标记酶、标记技术和酶底物的发展等,现在似乎什么蛋白、多少含量都可以用ELISA方法作检测。特别如肿瘤标志物的测定,许多年前就已经有ELISA方法的试剂盒和相应仪器供实验室使用。临床实践说明,对于治疗后的肿瘤病人做肿瘤标志物的测定是很重要的,因为肿瘤标志物的动态变化是指示肿瘤是否复发的灵敏指标。
我们知道ELISA试验可以手工或利用半自动设备(如洗板机、酶标仪等)进行操作,在免疫技术发展的初期,手工试验做定性试验,得出阴阳性结果,问题不大,准确率是非常高的。但是,现在越来越多的ELISA试剂盒开始用于定量检测,和全自动仪器实验结果相比,由于ELISA步骤繁多,只要手工操作中有任何一点疏忽,赖以确定定量结果的标准曲线都将画不好,使检验结果的可靠性大受影响。即使有洗板机也无法克服。
ELISA免疫试验的结果受多种因素影响,试剂盒的品质为主要影响因素,其次为试剂盒的使用状况,在操作过程直接影响试剂盒检测水平的发挥。因此,在完全按照试剂盒操作要求的前提下,均一、稳定、标准的操作过程和实验条件是获得最佳实验结果的必要条件,只有这样才能做到既有充分的灵敏性又有很好的重复性。全自动仪器的程序化操作避免了手工操作的局限性,消除了人为误差,提高了结果的精确度、准确度,增加了结果的可比性,特别是有利于弱阳性标本的检出。
综上所述,说明实现ELISA定量测定的重要环节是需要自动化,全自动酶免工作站可以完全替代手工操作,可全自动完成ELISA试验,包括稀释、样本分配、试剂分配、孵育、洗板、酶标判读、结果打印等全步骤,极大地提高了检测结果的可靠性,而且操作简单,日常维护保养方便,无需值守。全自动酶免分析系统已成为国内外检验科广泛用于临床需要免疫检测的主导和基础装备。
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